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PCR實驗室建設
發布日期:2021-10-26 

       《PCR實驗室如何建設規范》實驗室環境目前不斷對于《實驗室設計單位》《實驗室總包單位》要求資質齊全前提之下,要求對實驗室工藝經驗也要求十分苛刻,一般設計單位及施工單位都滿足不了對工藝上面的要求.

PCR實驗室的建設要點

1.PCR及核酸實驗室介紹

 

PCR核酸檢測實驗室是分子生物學研究和實驗的常規方法,也是生物學、醫學臨床等領域廣泛應用的實驗技術。

 

實驗室通常分為四個區域,即:試劑準備區、樣品制備區、核酸配制和擴增區、產物分析區(如使用全自動分析儀,區域可適當合并)。

 

進入各個區域必須嚴格按照單一方向進行(單向走廊),不同的工作區域使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開時,不得將工作服帶出。

普通PCR實驗室主要功能用房關鍵設備配置如下:

名稱

主要功能

主要設備配置(僅供參考)

試劑準備室

試劑的制備和貯存、試劑的分裝、主反應混合液的制備

常溫冰箱、低溫冰箱、混均器、微量加樣器(覆蓋0.2-1000ul)\移動紫外燈

樣本制備室

核算(RNA、DNA)提取、貯存擴增反應管的制作

常溫冰箱、低溫冰箱或超低冰箱、高速臺式冷凍離心機、混允器、水浴箱或加熱模塊、微量加樣器(覆蓋0.2-1000ul)、可移動紫外燈、生物安全柜

核酸擴增室

核酸擴增

核酸擴增儀、離心機、微量加樣器(覆蓋0.2-1000ul)、可移動紫外燈

產物分析室

擴增片段的測定

視檢驗方法不同而定,基本配置包括:凝膠成像分析系統、電泳儀和電泳槽、微量加樣器(覆蓋0.2-1000ul)、可移動紫外燈。

2.建設重點

1.1實驗室室內設計參數(僅供參考)

區域

潔凈度
等級

最小換氣次數(次/小時)

與室外方向上相鄰相通房間最小壓差(Pa)

溫度(℃)

相對濕度(%)

風速(m/s)

噪聲Db(A)

試劑儲存和準備區

8

12

+10

18-26

40-60

≤0.15

﹤60

樣本制備區

8

15

-10

18-26

40-60

≤0.15

﹤60

核酸擴增區

8

15

-15

18-26

40-60

≤0.15

﹤60

產物分析區

8

15

-20

18-26

40-60

≤0.15

﹤60

緩沖區

-

6

0

18-26

40-60

--

﹤60

PCR專用走廊

-

6

5

18-26

40-60

--

﹤60

通常PCR實驗室沒有嚴格的凈化要求,需根據實驗內容確定實驗室潔凈度。當PCR實驗樣品需要保護時,實驗室應設潔凈空調系統。對于2019-nCoV核酸檢測實驗室,建議設置10萬級凈化。

1.2.氣流組織建議

*氣流組織宜采用上送下排,送風口和排風口布置應使室內氣流停滯的空間降低到最小程度。

*在生物安全柜操作面或其他有氣溶膠操作地點的上方附件不得設送風口

*高效過濾器排風口應設在室內被污染風險最高的區域,單向布置,不得有障礙;

*不能以回(排)風夾墻代替排風直管,排風高效過濾裝置與排風總管的連接必須全部是實體風管。

 

1.3.實驗室建設的幾個關鍵點:

1、生物安全:按照新型冠狀病毒實驗室生物安全指南(第二版)的規定,2019-nCoV病原體暫按照第二類病原微生物進行管理,則樣本植被區宜為負壓或加強型P2實驗室,核酸操作應在生物安全柜內進行。

關鍵技術措施包括:

*絕對負壓(避免室內潛在污染外泄)

*氣流組織(室內定向流,從低污染風險區流向高污染風險區)

*排風無害化處理(高效過濾、高空排放)

2、平面布局:不論是組合式還是分散式布置的PCR實驗室,各功能房間均宜設置獨立緩沖間

3、區域空氣流向:為避免交叉污染,PCR實驗室空氣流向必須嚴格遵循單一方向進行,即智能從試劑貯存和準備區—標本制備區—擴增反應混合物配制和擴增區—擴增產物分析區。

4、通風空調:為避免交叉污染,各功能用房的空氣不能摻混?;旌鲜絇CR實驗室宜采用全新風直流式空調系統;當采用全新風系統有困難時,每區的空氣只能在其室內自循環。

 

3.設計依據

1新型冠狀病毒肺炎應急救治設施設計導則(以最新衛健委發布)

2??新型冠狀病毒實驗室生物安全指南(第二版,衛健委發布)

3??實驗室生物安全手冊(WHO第三版)

4??生物安全實驗室建筑技術規范(GB 50346-2011)

5??實驗室生物安全通用要求( GB19489-2008 )

6??科研建筑設計標準(JGJ91-2019)

7??醫院負壓隔離病房環境控制要求(GBT 35428-2017 )

8??病原微生物實驗室生物安全通用準則WS 233―2017

9??臨床實驗室生物安全指南WST 442-2014

4.核酸檢測實驗室關鍵點

核酸檢測實驗室有設計理念、實驗室裝修要求、實驗室凈化空調系統、實驗室通風、實驗室智能自控系統、實驗室工藝設備等幾個關鍵點。

 

裝飾裝修

材質:隔墻及吊頂——凈化彩鋼板、地面——同質透芯PVC地板、凈化實驗室專用門、觀察窗;

要求

1.墻面:光潔、不產塵積塵、耐腐蝕,易清潔消毒、無縫隙;

2.地面:防靜電、耐腐蝕、無縫隙、無滲漏;

3.陰陽角:均用圓弧角密封處理;

4.門:必須設置自動互鎖(機械或電子);

 

凈化空調、通風系統、自控系統

1.避免交叉污染,采用全新風空調系統;

2.樣品制備區嚴格按照BSL-2設計施工;

3.排風系統全部按照要求采用高效過濾器凈化;

4.氣流組織:采用上送下排形式;

5.壓力梯度控制通過微壓差計及精密自控系統控制;

6.實驗室入口處顯示房間內各項指標參數,并設置偏離報警;

 

工藝設備

 

1.實驗臺下部均留空,無死角;

 

2.全部采用不銹鋼304制作;

 

3.樣品制備區生物安全柜:BSC-||-B2型;

 

4.樣品制備區設置洗眼裝置,必要時應有應急噴淋裝置;

 

5.非接觸式操作理念(感應式水龍頭、感應式自動門、互鎖傳遞窗等);

 

《實驗室建設》涉及多個領域的技術和知識,包括材料的選擇,穩定性、精度的控制等等。不同的實驗室由于檢測樣本,檢測方法的不同,在實驗室建設方面的要求也就有著很大的不同,可謂失之毫厘,差之千里。一個建設良好的實驗室對于分析測試來說有著不可忽視的地位,同時也為保障實驗室人員的健康發揮著重大的作用。

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